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了解甘油三酯(TG)含量檢測原理

測定意義:TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。 
測定原理:
用異丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),在420 nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。 
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、雙蒸水。 

TG 是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。測定原理:用異丙醇抽提取 TG,KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在氣離子冇在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),在 420nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。

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注意事項:

1.試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì),實驗過程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時蓋緊。

2.加試劑二后需反復(fù)劇烈振蕩,使待測液中甘油三酯得到充分提取,振蕩幅度、時間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時間均應(yīng)保證一致。

3.為保證試驗的重復(fù)性,每次水浴后的冷卻時間要統(tǒng)一。

4.若測定管 OD值大于 1.5 時,建議將樣本用試劑一適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測,并在計算時需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)


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